山东省教育厅课题鉴定成果简

发布时间:2012-02-08文章来源: 浏览次数:

山东省教育厅课题鉴定成果简介

一、《猪胸膜肺炎放线杆菌血清型及毒素型研究与应用》简介

主持人:徐公义

员:王海丽 刘明凤葛长城 刘志林吕 俊吕云鹏 张桂菊 李英民 赵登福

项目编号:J09LC68

研究起止时间:2009.11~2010.12

成果形式:

1.猪胸膜肺炎放线杆菌种及血清1,5,7型多重PCR检测方法的建立(中国兽医科学,2009年第8期)

2.猪胸膜肺炎放线杆菌的PCR调查(中国畜牧兽医,2009年第9期)

3.鲁西地区猪胸膜肺炎放线杆菌血清型多重PCR研究(中国预防兽医学报,2009年第6期)

4.鲁西地区猪传染性胸膜肺炎调查(安徽农业科学,2009年第13期)

成果简介:

1.该研究对鲁西地区猪群进行了胸膜肺炎放线杆菌流行病学调查,并建立了检测APP血清型1、5、7以及APP种的多重PCR方法,确定了鲁西地区流行的猪胸膜肺炎放线杆菌的血清型,为猪传染性胸膜肺炎的防治提供了理论依据。

2.对APP血清1、2、3、5、7、10型等6种血清型开展了的APX毒素型研究,证明了血清型与毒素基因的相关性,为APP致病机理的研究提供理论依据。

3.根据胸膜肺炎放线杆菌种特异性外膜脂蛋白基因(OlmA)建立了OlmA-PCR诊断方法,定性检测APP。根据血清型1、5、7型特异性荚膜多糖(CPS)基因分别建立鉴别诊断APP血清型1、5、7的多重PCR检测方法,为胸膜肺炎放线杆菌血清型的鉴别诊断和流行病学检查奠定了基础。该多重PCR检测方法有良好的应用前景。

二、《猪链球菌血清型及毒力因子研究》简介

主持人:王海丽

员:葛长城 王凤华 吕云鹏 张桂菊 吕 俊 徐公义

项目编号:J08LF57

研究起止时间:2009.01~2010.12

成果形式:

1.四川脑膜炎病例猪链球菌2型溶血素抗原表位富集区的原核表达(中国兽医学报,2010年第4期)

2.猪链球菌2型epf基因的原核表达及其蛋白纯化(安徽农业科学,2009年第15期)

3.猪链球菌2型胞外因子的融合表达及其多克隆抗血清的制备(湖北农业科学,2009年第10期)

4.猪链球菌2型人源株MRP的表达及其单克隆抗体的制备与应用(中国兽医学报,2009年第7期)

5. SS2人源分离株ZYH24EF的表达纯化及其单克隆抗体的制备(中国人兽共患病学报,2009年第1期)

6.猪链球菌2型人源分离株溶血素融合蛋白的制备及免疫活性测定(安徽农业科学,2011年第6期)

成果简介:

1.猪链球菌的分离鉴定。对采集的病死猪病料和鼻拭子,进行细菌的分离、鉴定和耐药性研究。

2.猪链球菌血清型多重PCR调查。本研究根据猪链球菌谷氨酸脱氢酶(gdh)基因设计1对种特异性引物;根据血清型2、7、9荚膜多糖(cps)基因设计型特异性引物,建立多重PCR检测方法,可作为猪链球菌快速诊断和流行病学调查的重要手段。

3.分别对猪链球菌2型MRP、EF进行克隆与表达并制备了响应的单克隆抗体。分析、克隆猪链球菌2型mrp基因片段和epf基因片段,构建原核表达质粒pGEX4T-2-mrp,pGEX4T-2-epf。在大肠杆菌中诱导表达,经亲和层析法制备纯化MRP、EF抗原。以纯化的蛋白为免疫原,分别研制了6株能稳定分泌抗MRP的单克隆抗体的杂交瘤细胞系和2株抗EF的单克隆抗体的杂交瘤细胞系,为ELISA方法检测方法的建立提供了素材。

4.猪链球菌2型溶血素抗原表位富集区的原核表达。对猪链球菌2型溶血素中第230~593氨基酸残基区域的基因片段进行克隆表达,构建融合表达质粒pQE-30-sly转化至宿主菌TG1,经IPTG诱导融合基因表达,western blot提示该溶血素蛋白区域可作为猪链球菌的诊断抗原,为基因工程疫苗的研制奠定基础。

聊城市科技局课题鉴定成果简介

一、《重大猪病综合防控技术研究》简介

主持人:徐公义

员:王海丽 刘明凤葛长城 刘志林吕 俊吕云鹏 张桂菊 李英民 赵登福

项目编号:20082048

研究起止时间:2009 ~2010.12

成果形式:

1.猪胸膜肺炎放线杆菌种及血清1,5,7型多重PCR检测方法的建立(中国兽医科学,2009年第8期)

2.猪胸膜肺炎放线杆菌的PCR调查(中国畜牧兽医,2009年第9期)

3.四川脑膜炎病例猪链球菌2型溶血素抗原表位富集区的原核表达(中国兽医学报,2010年第4期)

4.猪链球菌2型epf基因的原核表达及其蛋白纯化(安徽农业科学,2009年第15期)

5.猪链球菌2型胞外因子的融合表达及其多克隆抗血清的制备(湖北农业科学,2009年第10期)

6.猪链球菌2型人源株MRP的表达及其单克隆抗体的制备与应用(中国兽医学报,2009年第7期)

7. SS2人源分离株ZYH24EF的表达纯化及其单克隆抗体的制备(中国人兽共患病学报,2009年第1期)

8.鲁西地区猪传染性胸膜肺炎调查(安徽农业科学,2009年第13期)

9.鲁西地区猪胸膜肺炎放线杆菌血清型多重PCR研究(中国预防兽医学报,2009年第6期)

成果简介

该项目建立了诊断APP及其血清1、5、7的型多重PCR检测方法。建立了SS及其血清2、7、9的型多重PCR检测方法,为APP、SS血清型的鉴别诊提供了可靠方法。利用建立的多重PCR方法对鲁西地区APP、SSS开展了血清型调查,为该病的诊断和防治提供了理论依据;制备了猪链球菌毒力因子MRP、EF单克隆抗体,为ELISA检测方法的建立奠定了基础;开展了猪瘟、猪蓝耳等病毒病的抗体监测和流行病学调查,并提出了综合防控对策。

该项目对重大猪病如猪瘟、猪蓝耳病、猪链球菌、猪胸膜肺炎放线杆菌等开展了疾病的诊断、流行病学监测、病原学研究等,对于养殖业的健康发展具有重要意义。

二、《重大鸡病快速诊断研究与应用》简介

主持人:葛长城

员:王海丽 李英民 赵登福刘明凤吕俊 张桂菊 吕云鹏 徐公义

项目编号:2009D070

研究起止时间:2009.12 ~2010.12

成果形式:

《重大鸡病快速诊断研究与应用》工作报告、技术报告

成果简介:

课题组采用4种方法比较研究了禽流感抗的体检测,对鸡场进行了禽流感、新城疫等重大鸡病血清学的长期动态监测,给疫病疾病的诊断和防控提供了理论依据;采用间接ELISA方法对鸡的4种免疫抑制病进行了长期的血清学监测,采用PCR方法对5种免疫抑制病进行了流行病学调查,为该类疫病的诊治和防控提供了可靠方法和理论依据。总之,该课题科研成果可以直接推广并应用到各大鸡场,对于鸡病的诊断、防治和综合防控均具有重大的意义。

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